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河南快3走直走势图:一代測序

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1常規3730測序

公司采用全新的3730XL測序儀,可以高自動化操作,2小時左右即可達到測序要求;液體分離膠使讀序長度達1100bp,精確讀長達800bp。利用Seqence5.2新型堿基識別與質量評分軟件,測序準確性有了極大的提高;電泳溫度可達70C,有效去除二級結構的影響;雙色激光兩側同時激發,使得靈敏度極高,熒光信號強度高度均勻,提高了測序模板DNA的濃度的適應范圍并且能進行超速測序。 

公司測序特點及優勢

高素質測序隊伍:測序人員都是經過了嚴格培訓;熟練掌握所有測序儀器和測序相關實驗,認真負責的工作態度,絕不把實驗交給實習生,保證差錯率做到最小甚至杜絕!

測序速度快:菌和PCR未純化收到樣品后36小時內出結果;質粒和PCR已純化24小時出結果。

價格合理: 根據不同樣品定出不同價格,有價可以測,有樣品就可以測,用最優惠最合理的價格充分配合你的實驗和經費。

困難模板服務:高GC,發夾結構,POLY結構等,根據不同模板做出不同測序方案,量身定做,使你在測序中節省更多時間,實驗順利進行。

保密性強:交給我們東西無原則絕對保密。

測序收費約定:


現象描述

可能原因

是否收費

菌培養不好或失敗

挑克隆有誤,菌污染,訂單提供信息有誤

質粒抽提不成功

質粒太大或活化方式不好、轉化不好、拷貝數低、培養方式不當

測序無信號、信號弱

引物與模板結合不好(引物或模板原因)

鑒定質?;騊CR濃度低,取消實驗

建議PCR(20ul) 、質粒(30ul)去離子水溶解

設計引物和序列拼接

大片段測序

抽提出質粒但測序不成功

引物與模板結合不好(引物或模板原因)

測序雜峰

引物不純,模板不純

信號中斷或衰減

高級結構,GC rich,重復序列。

測序雙峰

非單克隆、雜合子、引物特異性差、重復序列、Poly(A/T/G/C)結構、PCR非特異性擴增

空載體

插入失敗,培養過程中片段丟失

客戶提供引物導致結果不理想

引物不純,引物不合適測序

PCR原液純化后但測序不成功

引物與模板結合不好(引物或模板原因)

收純化費,不收測序費

測序收費價格(參考)


類型

價格

3730測序(5000-1w以上反應)

14元/反應

3730測序(1000-4999反應)

16元/反應

3730測序(1000以下,不低于96個/批

18元/反應

3730測序(批量樣品>48個

20元/反應

3730測序(零散樣品,小于48個)

25元/反應

PCR純化

5元/反應

引物合成

1.3/bp

測序樣品要求

PCR原液:片斷通常大于200bp;提供濃度大于50ng/ul,體積大于50ul;2ul電泳檢測主帶清晰。

PCR已純化:PCR產物溶于超純水中;濃度大于30ng/ul,體積大于20ul;電泳檢測條帶單一。

質粒 :質粒濃度大于100ng/ul,體積大于20ul;大質粒需要注明載體長度。

菌液模板要求:說明載體的抗性,我們提供Amp 、kan、chl、tet四種抗生素;

于低拷貝質粒請直接提供1ug純化質粒;

提供1ml左右的過夜培養菌液,于離心管中封口保存,防止交叉污染或泄漏,特別是熱天路遠的最好加15%的甘油,這樣處理一下以免菌死掉。

建議盡量提供穿刺培養的菌種,或用新鮮的菌裝到冰盒里運輸

引物要求:濃度大于3.2umol/l,體積大于20ul;

隨機引物、兼并引物或堿基長度大于30bp不適合測序;

盡可能提供引物全序列,PCR退火溫度;.

T7、SP6、M13(+)、M13(-)、T3等通用引物我們免費提供。

樣品類型及注意事項

樣品類型

標準

注意事項

500-1000ul新鮮菌液

可以提供5ml菌液或沉淀菌體直接提取質粒

質粒

濃度要求大于100ng/ul,大于20ul(反應個數多相應增加)

建議送前鑒定濃度。建議不要溶于TE,要溶于超純水。因為TE離子濃度很高,抑制測序反應,建議純化后溶于15-20ul超純水中

PCR已純化

濃度要求大于50ng/ul,20ul左右(反應個數多相應增加)

建議送前鑒定濃度。請注意我處是取2ul原液用1%瓊脂糖膠鑒定,客戶經?;崛?ul鑒定。建議純化后溶于15-20ul超純水中

PCR未純化

濃度要求大于50ng/ul,大于50ul(不宜分離相差小于150BP的多個片段)

建議送前鑒定濃度。請注意我處是取2ul原液用1%瓊脂糖膠鑒定,客戶經?;崛?ul鑒定。如濃度過低我們會直接停止實驗,通知客戶重供樣。